فرودگاه مشهد،فرودگاه مهرآباد،فرودگاه شیراز،فرودگاه تبریز
تاریخ : دوشنبه 10 مهر 1396
نویسنده : postaf
2-8- شاخه زایی ............... ....................................................................................................................................................29 2-9- ریشه زایی .....................................................................................................................................................................35 2-10- سازگاری .....................................................................................................................................................................37 فصل سوم مواد و روشها ............................. .........................................................................................................................39 3-1- محل انجام آزمایش .......................... ............................................................................................................................40 3-2- مواد گیاهی .............................. ....................................................................................................................................40 3-3- ضد عفونی ریز نمونه ها ............. .................................................................................................................................41 3-4- محیط های کشت ..................... ...................................................................................................................................42 3-5- تهیه محیط کشتQL ............... ...................................................................................................................................43 3-6- مرحله استقرار ..................... .........................................................................................................................................46 […]

دانلود پژوهش- – (155)

جدول 4-8- بررسی اثرغلظتهای مختلف IBA در ترکیب با NAA بر روی ریشهزایی دو رقم سیب ..............................83 جدول 4-9- تجزیه واریانس مقايسه ریشهزایی رقم سیب مربایی با استفاده از ریزنمونههای چند بار واکشت شده (ریزنمونه یکساله) و ریزنمونههای بعد از مرحله اسقرار (ریزنمونه جدید)در رقم مربایی ..... ................................................................90 فهرست شکل ها شماره صفحه شکل 3-1- درختان مادری پایه های سیب مربایی (چپ) و زینتی (راست) در ایستگاه تحقیقات باغبانی کمالشهر (اردیبهشت 92)............. ............................................................................................................................................................................40 شکل 3-2- نحوه جداکردن برگ ها وآماده کردن ریزنمونه ها در آزمایشگاه .. .....................................................................41 شکل 3-3- مراحل ضد عفونی ....... .....................................................................................................................................42 شکل 4-1-نمایی از نوع آلودگی ریزنمونه ها در مرحله استقرار الف- آلودگی قارچی و ب- باکتریایی رقم زینتی به ترتیب 1 و 2 هفته پس از کشت .......................................................................................................................................................... 53 شکل 4-2- مقایسه اثر محیط کشت پایه بر رشد و نمو ریزنمونه های سیب رقم مربایی در مرحله استقرار الف) محیط کشت پایه QL ب) محیط کشت پایه MS .......................................................................................................................................55 شکل4-3- مقایسه اثر IBA و BAP بر رشد و نمو ریزنمونه ها در مرحله استقرار الف) محیط کشت حاوی 5/0 میلی گرم در لیتر BAP به علاوه 1/0 میلی گرم در لیتر IBA . ب) محیط کشت حاوی 2 میلی گرم در لیتر BAP به علاوه 01/0 میلی گرم در لیتر IBA .......................... .........................................................................................................................................60 شکل 4-4- مقایسه دو غلظت 1 (ب) و 2 (الف) میلی گرم در لیتر BAP به همراه 1/0 میلیگرم در لیتر IBA بر رشد و پرآوری رقم سیب مربایی در مرحله پرآوری ........................................................................................................................72 شکل 4-5- رشد و نمو ریزنمونه ها در مرحله شاخه زایی سیب رقم زینتی (الف) و سیب رقم مربایی (ب) .....................73 شکل4-6- نمایی از شاخه زایی رقم سیب مربایی در محیط کشت حاوی 1 میلیگرم در لیترBAP به همراه 01/0 میلیگرم در لیتر IBA پس از گذشت 8 هفته.........................................................................................................................................74 شکل 4-7- نمایی از شاخه زایی رقم سیب مربایی در محیط کشت حاوی 2 میلیگرم در لیترBAP به همراه 1/0 میلیگرم در لیتر IBA ...........................................................................................................................................................................75 شکل 4-8- نمایی از شاخه زایی رقم زینتی(الف) و رقم مربایی (ب) در محیط کشت حاوی 5/0 میلیگرم در لیترBAP به همراه 1/0 میلیگرم در لیتر IBA پس از گذشت 4 هفته.. ......................................................................................................76 شکل 4-9- اثر زآتین در رقم زینتی بر رشد و نمو ریزنمونه ها در محیط کشت حاوی 2 میلی گرم در لیتر زآتین الف)و محیط کشت فاقد زآتین ب) ....................................................................................................................................................78 شکل 4-10- مقایسه رقم بر الف) تعدادبرگ در سیب رقم مربایی ب)و تعدادبرگ در سیب رقم زینتی..............................80 شکل4-11- اثر دو کربوهیدرات ساکارز (الف) و سوربیتول (ب)در رقم زینتی بر رشد و نمو ریزنمونه ها82 شکل 4-12- مقایسه ریشه زایی رقم مربایی در دو تیمار هورمونی: الف) محیط کشت حاوی 4 میلی گرم در لیتر IBA و 25/0 میلی گرم در لیتر NAA و ب) محیط کشت حاوی 1 میلی گرم در لیتر IBA و 25/0 میلی گرم در لیتر NAA .................................................................................................................................................................................................89 شکل 4-13- مقایسه ریشهزایی ریزنمونههای چند بار واکشت شده (الف) و ریزنمونههای بعد از مرحله اسقرار (ب) در رقم مربایی در محیط حاوی 4 میلی گرم در لیتر IBA و 25/0 میلی گرم در لیتر NAA .................................................................92 4-14- مراحل انتقال و سازگاری الف) خارج کردن گیاهچه از محیط کشت، ب) شستشو، ج) انتقال به خاک، د) گذاشتن پوشش شفاف، ه و و) انتقال به فیتوتورون ...............................................................................................................................93 شکل 4-15- مراحل انتقال و سازگاری الف) ایجاده روزنه در بالای پوشش برای تهویه هوا، ب) برداشتن پوشش، ج) انتقال به گلدان بزرکتر .......................................................................................................................................................................94 شکل 4-16- نمایی از رشد گیاهچه سیب مربایی(الف) و گیاهچه سیب زینتی (ب) پس از انتقال به گلدان بزرگ تر..............................................................................................................................................................................................94 شکل 4-17- نمای از پوسدگی (الف) و آلودگی کنه(ب) در گیاهچه ها در مرحله سازگاری ..............................................95 شکل 4-18- مقایسه رشد گیاهچه ها در قفسه با نورحدود 6000 لوکس (الف)، قفسه با نور حدود 2000 لوکس (ب) و گیاهچه های مربوطه از نمای نزدیکتر ج)................................................................................................................................95 فهرست نمودارها شماره صفحه نمودار 4-1- مقایسه میانگین اثر رقم برای صفات الف) درصد آلودگی ریزنمونه ب) درصد زنده مانی ریزنمونه ج) کیفیت ظاهری رشد ریزنمونه .................... ........................................................................................................................................54 نمودار 4-2- مقایسه میانگین اثر محیط کشت های مختلف برای صفات درصد آلودگی ریزنمونه (الف)، درصد زنده مانی ریزنمونه (ب)، کیفیت ظاهری رشد ریزنمونه (ج)، ارتفاع ریزنمونه (د) و تعداد برگ (ه) ......................................................54 نمودار 4-3- مقایسه میانگین اثر متقابل محیط کشتهای مختلف و نوع رقم برای صفات الف) درصد آلودگی ریزنمونه ب) درصد زندهمانی ریزنمونه ........ ...............................................................................................................................................56 نمودار 4-4- مقایسه میانگین اثر متقابل رقم و BAP برای صفت الف) درصد زنده مانی ریزنمونه ب) درصد ابتلا به آلودگی ریزنمونه ...................................................................................................................................................................................58 نمودار 4-5- مقایسه میانگین اثر متقابل IBA و BAP بر درصد زنده مانی ریزنمونه (الف) و درصد آلودگی ریزنمونه (ب............................................................................................................................................................................................59 نمودار 4-6- مقایسه میانگین اثر رقم بر الف) درصد زنده مانی ریزنمونه ب) درصد آلودگی ریزنمونه ج) تعداد جوانه در هر ریزنمونه....................................................................................................................................................................................61 نمودار 4-7- مقایسه میانگین اثر متقابل رقم، IBA و BAP بر الف) درصد زنده مانی ریزنمونه ب) درصد آلودگی ریزنمونه .................................................................................................................................................................................................64 نمودار 4-8- مقایسه میانگین اثر نوع رقم و مدت زمان قرارگیری ریزنمونهها در محیط کشت بر روی صفات رشد ریزنمونه الف) تعداد برگ ب) کیفیت ظاهری رشد ..............................................................................................................................64 نمودار 4-9- مقایسه میانگین اثر متقابل محیط کشتهای مختلف و مدت زمان قرارگیری ریزنمونهها در محیط کشت بر روی صفات رشد ریزنمونه الف) تیپ رشدی ریزنمونه ب) طول شاخه ج) تعداد برگ د) تعداد برگ د) کیفیت ظاهری رشد ..................... ...........................................................................................................................................................................65 نمودار 4-10- مقایسه میانگین اثر متقابل محیط کشتهای مختلف و نوع رقم بر روی صفات رشد ریزنمونه الف) تیپ رشدی ریزنمونه ب) طول شاخه ج) کیفیت ظاهری رشد .......................................................................................................66 نمودار 4-11- مقایسه میانگین اثر سه گانه مدت زمان کشت ریزنمونه، نوع رقم و نوع محیط کشت بر روی کیفیت ظاهری رشد ریزنمونه ..........................................................................................................................................................................67 نمودار 4-12- مقایسه میانگین اثر ساده مدت زمان کشت ریزنمونه بر روی صفات رشد ریزنمونه الف) تیپ رشدی ریزنمونه ب) طول شاخه ج) تعداد برگ د) کیفیت ظاهری رشد ..........................................................................................................70 نمودار 4-13- مقایسه میانگین اثر نوع رقم بر روی صفات رشد ریزنمونه الف) میانگین تعداد شاخه تولید شده در هر ریزنمونه ب) میانگین تعداد برگ در هر ریزنمونه ج) کیفیت ظاهری رشد ریزنمونه ..............................................................71 نمودار 4-14- مقایسه میانگین اثر ساده تیمار هورمونی مختلف بر روی تعداد شاخه تولید شده در هر ریزنمونه ..................72 نمودار 4-15- مقایسه میانگین اثر متقابل نوع رقم و مدت زمان کشت ریزنمونه بر روی تعداد شاخه تولید شده در هر ریزنمونه ...... ..........................................................................................................................................................................73 نمودار-4-16- مقایسه میانگین اثر متقابل تيمارهای هورمونی و زمان بر شاخص کیفیت ظاهری رشد در هر ریزنمونه.........74 نمودار 4-17- مقایسه میانگین اثر متقابل تيمارهای هورمونی و رقم بر تعداد شاخه تولید شده در هر ریزنمونه....................75 نمودار 4-18- مقایسه میانگین اثر متقابل تيمارهای مختلف هورمونی، نوع رقم و مدت زمان کشت ریزنمونه بر تعداد شاخه در هر ریزنمونه .......................................................................................................................................................................76 نمودار 4-19- مقایسه میانگین اثر متقابل نوع رقم و غلظت زآتین: الف) تعداد برگ در هر ریزنمونه، ب) کیفیت ظاهری رشد .................................................................................................................................................................................................78 نمودار 4-20- مقایسه میانگین اثر نوع رقم و هورمون GA3 الف) بیشترین تعداد برگ ب) بهترین کیفیت ظاهری رشد برای رقم مربایی ..............................................................................................................................................................................80 نمودار 4-21- مقایسه میانگین اثر نوع رقم و کربوهیدرات الف) بیشترین تعداد برگ ب) بهترین کیفیت ظاهری رشد برای رقم مربایی ................. ............................................................................................................................................................82 نمودار 4- 22- میانگین اثر رقم بر روی طول ریشههای تشکیل شده .....................................................................................84 نمودار 4- 23- مقایسه میانگین اثر IBA بر روی الف) درصد ریشهزایی ب) کیفیت ظاهری رشد .....................................85 نمودار 4- 24- مقایسه میانگین اثر NAA بر روی درصد ریشهزایی ریزنمونه ...................................................................86 نمودار 4- 25- مقایسه میانگین اثر متقابل IBA و NAA بر روی الف) درصد ریشهزایی و ب) کیفیت ظاهری رشد .......87 نمودار 4- 26- مقایسه میانگین اثر متقابل رقم، IBA وNAA بر روی الف) درصد ریشهزایی و ب) کیفیت ظاهری رشد .................................................................................................................................................................................................88 نمودار 4-27- مقایسه میانگین ریشهزایی رقم سیب مربایی با استفاده از ریزنمونههای چند بار واکشت شده (ریزنمونه یکساله) و ریزنمونههای بعد از مرحله اسقرار (ریزنمونه جدید). الف) تعداد ریشه تشکیل شده ب) ادرصد ریشهزایی ج) کیفیت ظاهری رشد ............... .................................................................................................................................................91 چکیده این مطالعه به منظور بهينه سازي روش ريزازديادي دوپايه بومي پاكوتاه كننده سيب (زينتی و مربايي) و بهبود مرحله استقرار و شاخه زايي آنها انجام شد. ابتدا از سر شاخه های سالم و فعال درختان مادری این پایه ها در طول فصل رشد نمونه گرفته شد. پس از تهيه ريزنمونه‌ها (جوانه های جانبی و انتهای از سرشاخه های سالم، جوان و بالغ) و ضدعفوني سطحي آنها با استفاده ازهيپوکلريد سديم و توين20، نانوسیلور، روي محيط‌هاي DKW، QL، WPMو MSحاوي مقادير مختلف سیتوکنین ها و اکسین ها، در شرايط درون شيشه‌اي مستقر شدند. پس از طي مرحله استقرار و انتخاب بهترين محيط كشت پايه، ريز‌شاخه‌ها براي بهينه‌سازي مراحل پرآوري شاخه و سپس ريشه‌زايي مورد استفاده قرار گرفتند. در این تحقیق تأثیر تیمارهای مختلف بر استقرار، پرآوری و ریشه زایی شاخساره ها، تاثیر چهار محیط کشت پایه برای بدست آوردن بهترین محیط کشت پایه در مرحله استقرار دو رقم مربایی و زینتی مورد بررسی قرار گرفت. در آزمایش دیگر اثر سه محیط پایه QL, MS, WPM برای بدست آوردن بهترین محیط کشت پایه در مرحله شاخه زایی و همچنین کاربرد غلظتهای مختلف BAP در ترکيب با IBA در مرحله شاخهزایی بررسی شد. همچنین دو نوع منبع قندی ساکارز و سوربیتول، اثرغلظتهای مختلف IBA در ترکیب با NAA بر ریشهزایی ریزنمونههای چند بار واکشت شده (ریزنمونه یکساله) و ریزنمونههای بعد از مرحله اسقرار (ریزنمونه جدید) در رقم مربایی مورد مطالعه قرار گرفت. نتایج حاصل نشان داد که در مرحله استقرار بهترین پارامترهای رشدی در محیط کشت پایه QL بدست آمد. در مرحله پرآوری بهترین تیپ رشدی و بیشترین طول شاخه برای ریزنمونههای کشت شده در محیط کشت پایه WPM بدست آمد. بیشترین تعداد شاخه در دو محیط کشت حاوی 5/0 میلیگرم در لیترBAP به همراه 1/0 يا 01/0 میلیگرم در لیتر IBA برای رقم زینتی حاصل شد. نتایج پژوهش حاضر نشان داد که بیشترین تعداد برگ و بهترین کیفیت ظاهری رشددر محیط کشت حاوی 30 گرم در لیتر ساکارز در مقایسه با سوربیتول برای رقم مربایی بدست آمد. کاربرد 4 میلیگرم در لیتر IBA به همراه 25/0 میلیگرم در لیتر NAA بیشترین درصد ریشهزایی و طول ریشه را برای رقم سیب مربایی به دنبال داشت. بیشترین درصد تشکیل ریشه، بیشترین تعداد ریشه تولید شده در هر ریزنمونه و همچنین بهترین شاخص کیفیت ظاهری رشد ریزنمونه برای ریزنمونههای چند بار واکشت شده (یکساله) مشاهده گردید. واژه های کلیدی: سیب (Malus × domestica. Borkh) ريزازديادی، استقرار، پرآوری شاخه، ریشه زایی فصل اول کلیات مقدمه بشر از هزاران سال قبل در تلاش برای بدست آوردن غذا و سرپناه بوده و در این مدت برای برای انتخاب بهترین گیاهان مطابق با خواسته های خود تلاش زیادی نمودند است که میوه، سبزی و صیفی نیز بخشی از نیازهای غذای را تشکیل داده است (ایزدپناه، 1380). پیش بینی می شود در سال 2015 میلادی جمعیت دنیا به 8 میلیارد نفر و در پایان نیمه اول قرن حاضر به 10 میلیارد نفر افزون گردد. در صورت تحقق این پیش بینی باید تولید مواد غذایی در سال 2015 میلادی به دو برابر میزان کنونی افزایش یابد (میرمحمدی میبدی، 1382). تلاش متخصصین کشاورزی در دهه های اخیر، باعث افزایش توانایی بشر در تولید مواد غذایی شده است، به طوری که در دو دهه اخیر آمار و ارقام گویای افزایش تولد مواد غذایی بوده است (میرمحمدی میبدی، 1382). تکنیک های سنتی به نژادی گیاهان، پیشرفت های قابل توجهی را در اصلاح ارقام با پتانسیل بالای تولید به وجود آورده اند ولی این تکنیک ها قادر نیستند میزان تولید میوه ها و سبزی ها را نسبت به افزایش تقاضا برای این محصولات در کشورهای در حال توسعه بالا ببرند. لذا نیاز ضروری به استفاده از بیوتکنولوژی برای سرعت دادن به توسعه برنامه های اجرایی احساس می شود (ایزدپناه، 1380). بیوتکنولوژی یک جنبه جدیدی از بيولوژی و علوم کشاورزی است که ابزار و راهکار های جدیدی را برای حل مشکلات تولید غذا در دنیا مهیا می سازد. تکنولوژی های جدید حاصله در راستای افزایش کارایی نهاده های تولیدی (نظیر آب، خاک، نیروی انسانی، انرژی، بذر و نهال) بود و باید در راستای بکارگیری حداقل نهاده ها با بالاترین کارایی تولید استفاده شود( ایزدپناه، 1380). در سالهای اخیر کشت های متراکم درختان میوه در دنیا توسعه یافته که به جای کاشت چند صد اصل درخت در هکتار، هزران اصله نهال در هکتار را می توان کشت کرد. علاوه بر آن اخیرا باغبانی منازل[1] نیز مورد توجه قرار گرفته و در کشورهای پیشرفته، توسعه یافته است. برای دستیابی به این هدف، استفاده از پایه های کوتاه کننده در درختان میوه در سالیان گذشته مورد توجه قرار گرفته است. امکان احداث باغات یکدست با استفاده از نهال های بذری امکان پذیر نبوده لذا پایه های تولیدی باید به روش های رویشی تکثیر شوند و مورد استفاده قرار گیرند. در واقع مدیریت صحیح باغ باعث افزایش عملکرد در واحد سطح، داشت و برداشت مکانیزه باغ ها می شود. در نهایت استفاده از پایه های مقاوم در باغ به تناسب شرایط اقلیمی و محیطی مستلزم تکثیر پایه های مقاوم، پاکوتاه و رویشی خواهد بود (ایزد پناه، 1380). به منظور تولید انبوه نهال های مورد نیاز، به کارگیری روش های آزمایشگاهی (کشت بافت) در دنیا رواج یافته است و سالیانه در کشورهای توسعه یافته و بعضی از کشورهای در حال توسعه مانند ترکیه، مصر، هند و غيره چندین میلیون نهال و نشاء تولید می شود .در این رابطه تکثیر پایه های کوتاه کننده سیب به روش کشت بافت، برای تولید نهال های یکسان، ارزان و پاکوتاه ضرورت دارد و در صورت کار بر روی پایه های مورد استفاده در باغبانی منازل، از طریق استفاده از تکنیک های کشت بافت می توان به در ختان پاکوتاهی دست یافت که در عین زینتی بودن و باردهی خوب در آپارتمان ها نیز قابل استفاده و پرورش خواهند بود (کهریزی و همکاران، 1386). اساس نظری تکنولوژی کشت بافت با ایده گوتلیب هابرلند در مورد پرتوانی (تولید یک موجود از یک سلول) در اوایل قرن بیستم شروع گردید. هابرلند اظهار داشت که تکنیک های جداسازی و کشت بافت های گیاهی باید توسعه یابند که اگر محیط کشت و تغذیه سلول های کشت شده دستورزی گردد، این سلول ها مراحل رشد و نمو طبیعی گیاهی را طی چند سال تکرار خواهند نمود. وی پیش بینی کرد که کشت بافت سلول های جنینی گیاهی می تواند موفق باشد. بنابراین وی مفهوم پرتوانی را ارائه کرد. تجارب پیشرفته او قبل و بعد از 1902 باعث شد که هابرلند به شکلی قابل توجیه به عنوان پدر کشت بافت شناخته شود. او فکر میکرد اگر تمام مواد غذایی مورد نیاز در اختيار سلول قرار گیرد می تواند به گیاهی کامل تبدیل شود. اولین کشت بافت موفق توسط وایت[2] در سال 1934 انجام شد او اولین کشت کالوس موفق هویج و توتون را تا سال 1939 گزارش داد در واقع پیشرفت های بعد از هابرلند که جزئیات زیادتری را در مورد کشت بافت گیاه بدست آورد به وسیله وایت (1963) و رزدان[3] و بوژانی (1983) بدست آمد (کهریزی و همکاران، 1386). ریزازدیادی به عنوان یکی از روش های نوین افزایش انبوه گیاهان بویژه پایه های درختان میوه در چند دهه اخیر بیشتر مورد توجه بوده است. پایه های رویشی تولیدی غالبا عاری از آلودگی، دارای خلوص ژنتیکی و از نظر اقتصادی مقرون به صرفه هستند که برای تولید و احداث باغات یکدست و متراکم استفاده می شوند. از آنجایی که اساس احداث باغهای مکانیزه بر تولید نهال های رویشی و یکسان استوار است لذا بررسی روش های تکثیر رویشی مناسب بخصوص ریزازدیادی برای تولید انبوه پایه ها حائز اهمیت است (دژم پور، 1386). تکثیر رویشی از پرکاربردترین تکنولوژی های کشت بافت است از سه طریق انجام می گیرد: 1)کشت جوانه انتهایی و جانبی که به میزان زیادی ریخته ارثی گیاه حفظ می شود. 2) تولید جوانه های نابجا به طور مستقیم یا غیر مستقیم. 3) جنین زایی سوماتیکی مستقیم یا غیرمستقیم که پتانسیل تولید بیشترین تعداد گیاه را دارد ولی در تعداد کمی از گونه های گياهی قابل اجرا است. به طور کلی در شرایط کشت درون شیشه ای[4] این امکان وجود دارد که عملیات تکثیر را در تمام طول سال و به طور دائم انجام داد (هارتمن[5] و کستر[6] ، 1990). با توجه به سوابق و اطلاعات موجود می توان اظهار داشت که باغبانی منازل و استفاده از پایه های کوتاه کننده سهم به سزایی در استفاده از روش های تکثیر درون شیشه ای و تولید انبوه گیاهان سالم ویکنواخت دارد که به ککمک آن می توان گونه های برتر گیاهی موجود در طبیعت را به سرعت تکثیر و از آنها برای برنامه های اصلاحی و یا عرضه مستقیم به بازار استفاده کرد. پایه های رویشی کوتاه کننده به دلیل خصوصیاتی نظیر زودرسی، مقاومت در برابر بیماریها و عملکرد بالا نقش مهمی در باغبانی دارند ( سانساوینیز[7] و لوگی[8]، 1996). مناطق عمده تولید سیب در جهان بین عرض های شمالی و جنوبی 30 تا 60 درجه قرار گرفته است. به عنوان مثال سیب به ترتیب در کشورهای اروپای غربی، آمریکا، ارپای شرقی، کانادا، ژاپن، استرالیا و آرژانتین کشت می شود. عملکرد درختان سیب در حال رشد این مناطق بسیار متنوع است (میرمحمدی میبدی، 1382). بر اساس آمار منتشر شده از سوی سازمان خواروبار کشاورزی جهان[9]، تولید سیب در سال 2012، 76378738 هزار تن بوده. در بین کشورهای جهان، ده کشور چین، آمریکا، ترکیه، لهستان، هند، ایتالیا، و و ایران جزو کشورهای عمده تولید کننده سیب می باشد. ایران کشوری با وسعت 6/1 میلیون کیلومتر مربع است که تولید سیب در ایران در سال 2012، 1700000تن بوده است (F.A.O). با توجه به مشکل تکثیر رویشی پایه های کوتاه کننده، این تحقیق با هدف تکثیر درون شیشه ای پایه های کوتاه کننده بومی سیب مربایی و زینتی انجام گرفت. در این تحقیق بررسی قابلیت ریزازدیادی و تعیین مناسب ترین محیط کشت و شرایط رشدی در کشت درون شیشه ای این دو رقم صورت گرفت. 1-1- تاریخچه سيب سیب یکی از میوه هائی است که از زمان های بسیار قدیم مورد استفاده بشر قرار گرفته است. قدیمی ترین آثاری که از این گیاه بدست آمده مربوط به فسیل سیبی است که در حفاری های نزدیک سوئیس پیدا شده و متعلق به ادوار ما قبل تاریخ می باشد. موطن اصلی آن طبق نظریه دانشمندان بدون شک قسمت های جنوبی قفقاز و ترکمنستان بوده و حتی امروزه نیز می توان در این نواحی انواع وحشی سیب را در جنگل های بسیار انبوهی مشاهده نمود (شیراوند، 1390). به این لحاظ تصور به این است که مرکز تنوع اصلی پیدایش سیب کنونی (Malus × domestica Borkh.) آسیای مرکزی می باشد این گونه از اولین درختان میوه اهلی شده توسط انسان بوده و سابقه کشت و کار آن به دوران ما قبل تاریخ باز می گردد. عبور جاده ابریشم از یک سو به سمت چین و از طرفی به سمت خاورمیانه و اروپا طی قرن های متوالی سبب گسترش هرچه بسشتر این گونه به سمت شرق و غرب شده است. در حال حاضر نیز صدها ژنوتیپ محلی و بومی در جای جای کشور یافت می شود که حکایت از نقش ایران در تکامل انواع تجاری و برتر سیب طی قرون گذشته دارد. متعاقب آن ژنوتیپ های مختلف از سمت آسیا به اروپا گسترش ضمن شروع عصر جدیدی در فرآیند گزینش و اصلاح سیب، سبب معرفی شمار قابل توجهی از ارقام اولیه و جدید طی دو قرن اخیر شد (گنجی مقدم، 1390). 1-2- مشخصات گیاه شناسی سیب از نظر رده بندی و سیستماتیک سيب جزء دانه زادان[10]، نهان دارندگان[11] ، دولپه ایها[12] و از طبقه روزالیس[13] و خانواده گل سرخیان[14] و زیر خانواده[15] با نام علمی Malus Pumila می باشد (منیعی، 1371). در جنس Malus 25 گونه و چندین زیرگونه وجود دارد. عدد پایه کروموزمی آن برابر 17، (X=17) بوده و تعداد کروموزم های آن متفاوت (34،58،68) است (طه نژاد،1380). سیب دارای میوه های شفت و گیاهی تک پایه است و شکل ظاهری آن به دو صورت درخت و درختچه دیده می شود (میرمحمدی میبدی، 1382). ریشه گیاه با توجه به نوع بافت خاک (خواص فیزیکی و شیمیایی)، واریته و اثرات متقایل عوامل محیطی، میتواند تا چندین متر در خاک فرو رود (طه نژاد، 1380) . به طور معمول گسترش ریشه در درختان جوان سیب اغلب به صورت عمودی به طرف عمق خاک، حتی تا یک متر می رسد و سپس ریشه های جدیدی ظاهر شده که بیشتر دارای رشد عرضی می باشند (شیراوند، 1390) . بیشترین رشد ریشه ها، در بهار از زمان بازشدن جوانه ها تا خرداد ماه است (طه نژاد، 1380). تنه درخت سیب که حامل تاج آن می باشد برحسب ارتفاع آن به 3 دسته به شرح ذیل تقسیم می شود: 1- پا کوتاه: ارتفاع آن کوتاهتر از 100 سانتیمتر 2- پا متوسط: ارتفاع آن 100 تا 160 سانتیمتر 3- پا بلند: ارتفاع آن بلندتر از 160 سانتیمتر معمولاً برای پرورش درختان پابلند و یا متوسط از پایه های بذری و پایه های غیر بذری MM109، MXI، MIV و برای درختان پاکوتاه از پایه های غیر بذری MII، MVII، MIX استفاده می گردد (شیراوند، 1390). ساقه درخت به سبب حالت خاص، قابلیت انعطاف پذیری و پرورش نهایی را به انواع فرم ها دارد (طه نژاد، 1380). ارتفاع درختان از 5/1 تا 8 متر است. در بعضی از ارقام شاخه ها با تنه اصلی دارای زاویه نزدیک به قائمه و در برخی دیگر زاویه تنگ تشکیل می دهد وتنه پس از 7 تا 8 سال دارای نسخ چوب پنبه ای و ناصاف می گردد (میرمحمدی میبدی، 1382). تاج درخت سیب از مجموعه شاخه های مختلف تشکیل یافته که بر حسب چگونگی پرورش و تربیت درخت تاج آن دارای اشکال متفاوتی می باشد مثل تاج کروی، تاج مخروطی، تاج پهن و غيره. به طور کلی شاخه های درخت سیب را از نظر اندازه و چگونگی خواص آن به شاخه های اصلی و شاخه های فرعی تقسیم می کند. شاخه های اصلی: این شاخه ها که مستقیماً به تنه درخت متصل بوده و از تنه درخت منشعب شده. شاخه های فرعی: این شاخه ها که از انشعابات و یا از تقسیمات شاخه های اصلی به دست آمده مستقیماً بر روی شاخه های اصلی قرار داشته (شیراوند، 1390) . گسترش تاج درخت سیب از 2 تا 8 متر متغیر است (میرمحمدی میبدی، 1382). گل های درختان سیب مانند گلهای سایر نباتات تیره Rosaceae کامل و منظم بوده و دارای پنج کاسبرگ، پنج گلبرگ با رنگهای سفید تا کمی قرمز در حدود 10 تا 16 پرچم و مادگی پنج برچه ای می باشند. کلاله و خامه گلهای سیب معمولاً جدا از یکدیگر و تخمدان آن تحتانی یعنی 4 تا 6 عدد می باشد. گلهای درختان سیب معمولاً به صورت مجتمع در حدود 3 تا 8 عدد به صورت گل آذین خوشه ای (دیهیم) بر روی شاخه های کوتاه یا میخچه ها قرار دارند. گلهای درختان سیب در اوایل بهار شکوفا می گردند. زمان باز شدن گلها معمولاً رابطه مستقیمی با چگونگی درجه حرارت و نوع واریته و میزان رشد غنچه ها دارد (شیراوند، 1390). میوه سیب یک پوم فاقد سلول های اسکلرئیدی است و کاسه ی گل پایا و یا خزان کننده می باشد (گنجی مقدّم، 1390). جوانه های درخت سیب بر دو نوع برگی و گل تقسیم می شوند. جوانه های برگی هر ساله در طول شاخه های جوان در بغل برگها بوجود می آیند و جوانه های گل همیشه در انتهای شاخک های کوتاه که به میخک معروفند ظاهر می شوند (منیعی، 1371). 1-3-ارزش غذایی سيب بر اساس استاندارد وزارت کشاورزی ایالات متحده آمریکا یک عدد سیب واجد پوست به وزن متوسط 182 گرم به طور متوسط دارای 25 گرم کربوهیدرات، 4 گرم فیبر و 19 گرم قند است که براورد کننده 8% نیاز روزانه به کربوهدرات کل و 18% نیاز روزانه به فیبر در یک انسان با 2000 کالری روزانه انرژی است. همچین این مقدار سیب دارای پوست 2% نیاز به ویتامین A، 14% ویتامینC ، 2% کلسیم و 2% آهن مورد نیاز چنین شخصی را برآورد می کند (گنجی مقدّم، 1390). سیب در تقویت قلب، اعصاب و هوش و متعادل کردن فشارخون، موثر بوده و به علت وجود کلسیم زیاد در ترمیم نارسایی های ناشی از سستی استخوان اثرات مفیدی دارد. مصرف سیب، مانع تشکیل اسیداوریک در بدن شده و دفع اسیدفورمیک را افزایش می دهد و برای بیماری های نقرس، دستگاه ادراری، ورم مفاصل، ورم حاد و مزمن روده در اطفال و بزرگسالان، بیماری های پوستی و اگزما های مزمن، بیخوابی و درمان سرماخوردگی و سرفه و ناراحتی برونش ها مفید است. با تجزیه شیمیایی سیب، هورمون های رشد (مخصوصاً در دانه آن)، آنزیم هایی مانند آمیلاز، پروتئاز و پروکسیداز، اسانس ها و الکل متیلیک و پروپیلیک، اسید آمینه آزاد شامل: تریپتوفان، آسپارین، رنگدانه ها و ویتامین ها به دست می آید (رادمهر، 1390). 1-4- شرایط آب و هوایی به دلیل نیاز سرمایی بالای درخت سیب امکان کشت ارقام معمولی این درخت عمدتاً در نیمه شمالی کشور، جایی که نیاز سرمایی بیش از 1000 ساعت را با دمای 4 تا 7 درجه سانتی گراد برای آن تامین می کند وجود دارد. لذا کشت درخت سیب در مناطق جنوبی تر کشور در حد محدود صرفاً به ارتفاعات اقلیم سرد نظیر کوهستان محدود است. همچنین، در صورتی که در مناطق سردسیر نیز دمای فصل زمستان آنچنان سرد نباشد که نیاز سرمایی زمستانه این درخت تامین گردد، باردهی درخت با مشکل مواجه خواهد شد. از دیگر مشکلات کاشت درخت سیب در مناطق بسیار سرد افت شدید دمای زمستانه و سرمازدگی تنه در شماری از ارقام است (گنجی مقدّم، 1390). لازم به ذکر است ارقام مختلف سیب به شرایط آب و هوایی مختلف واکنش متفاوتی نشان می دهند، لیکن برخلاف گلابی و به، این درخت مناطق مرتفع را که دارای ارتفاع بیش از 1200 متر می باشند به دشت ها ترجیح داده و در چنین شرایطی میوه سیب دارای کیفیت بهتر و رنگ پذیری بیشتری است (گنجی مقدّم، 1390). 1-5- شرایط خاک بطور کلی درختان میوه دانه دار و هسته دار به خاک های لومی تا شنی لومی که دارای زهکش مناسب باشند نیاز دارند. در بین درختان میوه دانه دار سیب از حساس ترین گونه ها به پوسیدگی طوقه است. بنابراین کشت این درخت در مناطقی که دارای زه آب نبوده و یا به دلیل بالا بودن میزان رس در لایه های سطحی خاک، طوقه درخت به مدت طولانی با رطوبت بالا مواجه می گردد قابل توصیه نیست. علاوه بر حساسیت این درخت به رطوبت خاک، سیب حساسیت قابل توجهی به کلروز آهک نشان داده و کشت آن در مناطق دارای لایه آهکی و یاpH بالا قابل توصیه نیست (گنجی مقدّم، 1390). 1-6- تکثیر سيب سیب از دو طریق جنسی و غیر جنسی تکثیر می گرذد. 1-6-1- ازدیاد جنسی: در این روش نهال از کشت بذر بدست می آید که از نظر خواص ژنتیکی، نهال بدست آمده خالص نبوده و هتروزیگوت هستند. از کاشت بذر بیشتر برای تهیه پایه (نرک) و همچنین اصلاح نباتات استفاده می شود (میرمحمدی میبدی، 1382). پایه های بذری به طور معمول دارای قدرت رشد زیادی بوده و مقاومت آن در مقابل سرما و خشکی زیاد می باشد. ریشه های پایه های بذری قوی و بسیار محکم بوده و درختانی که بر روی چنین پایه هایی قرار می گیرند دارای عمر بیشتری هستند. یکی از نقايص بزرگ پایه های بذری دیر شروع شدن دوره زایش نهال مربوط می باشند (شیراوند، 1390). 1-6-2- پایه های غیر بذری: ازدیاد غیرجنسی نیز برای بدست آوردن نهال پایه و برخلاف کاشت بذر، نهال رشد یافته دارای کلیه خواص پایه مادری می باشند. ازدیاد غیر جنسی به روشهای مختلف پاجوش، قلمه، خوابانیدن شاخه، تنه جوش و ریشه جوش انجام می گیرد (میرمحمدی میبدی، 1382). این پایه ها طیف گسترده ای را از میزان رشد، مقاومت به آفات و بیماری ها و همچنین تنش های محیطی نشان داده و در مواردی سبب زود باردهی رقم پیوندی می شوند. رایج ترین پایه های رویش سیب شامل دو سری پایه های مالینگ نظیر M9، M26 و M27و پایه های سری مالینگ مرتون نظیر MM106 و MM111 می باشند. تکثیر این پایه ها به روش خوابانیدن در عمل اقتصادی ترین روش است. لازم به ذکر است به منظور تولید نهال سالم بایستی به این نکته توجه کرد که پایه و پیوندک های مورد استفاده هر دو بایستی از مواد کنترل شده از نظر ویروس انتخاب و گرنه ضمن ارائه نهال غیر سالم سبب اتلاف زحمات تولید کنندگان در راستای افزایش عملکرد و همچنین منجر به افت کیفیت محصول خواهد شد (گنجی مقدّم، 1390). 1-7- روش های پاکوتاه کردن پایه ها به دو روش زیر می توان باغ های مسن را به باغ های متراکم با پایه های مالینگ تبدیل و پایه ها را کوتاه کرد. 1-7-1- پیوند واسطه: اگر چند سانتی متر از چوب رقم پاکوتاه کننده بین پایه بلند معمولی و واریته مورد نظر قرار گیرد، از رشد آن جلوگیری و آن را کوتاه می کند این روش برای ارقامی مانند EM-IX و EM-VII به کار می رود. 1-7-2- تعویض قسمتی از پوست: در این روش، حلقه ای از پوست ساقه پایه را با پوست ساقه پایه کوتاه کند تعویض می کنند (طه نژاد، 1380). 1-8- تربیت درختان پا کوتاه امروزه با توحه به پیشرفت روز افزون مسایل تکنولوژی و صنعتی در زمینه باغداری برای بالا بردن میزان باردهی و اجرای عملیات باغداری، سیستم کشت و پرورش درختان سیب، کم و بیش دستخوش تغییراتی شده و ارقامی را بعنوان پا کوتاه مورد استفاده قرار می دهند. این پایه ها حاصل تکثیر غیرجنسی مثل قلمه زنی و خوابانیدن هستند.
----------- نکته مهم : هنگام انتقال متون از فایل ورد به داخل سایت بعضی از فرمول ها و اشکال درج نمی شود یا به هم ریخته می شود یا به صورت کد نمایش داده می شود ولی در سایت می توانید فایل اصلی را با فرمت ورد به صورت کاملا خوانا خریداری کنید: سایت مرجع پایان نامه ها (خرید و دانلود با امکان دانلود رایگان نمونه ها) : elmyar.net **************** این پايه ها، دارای مزایای زیر هستند: - مقاومت در مقابل بیماری های ویروسی. - مقاومت در مقابل بیماری پوسیدگی طوقه. - مقاومت در مقابل شته های مومی سیب. - قابلیت تکثیر غیر جنسی خوب (طه نژاد، 1380). 1-9- پایه های سیب تاریخ نشان می دهد که نخستین پایه های پاکوتاه کننده سیب شامل دو دسته بودند: دسته اول به عنوان پارادیس (Pa--ise) فرانسوی خیلی پاکوتاه کننده. دسته دوم به عنوان پارادیس انگلیسی (دوسین-Doucin ) کمتر پاکوتاه کننده. طبقه بندی پایه های کوتاه کننده به عنوان پارادیز یا دوسین در اواسط دهه 1800 در اروپا انجام گرفته است. با وجود این، پس از آن بسیاری از مواد گیاهی با تفاوت های بیشتر با همان نام های معمولی (پارادیس یا دوسین) نامیده شدند. پایه های جدید زیادی اشتباهاً تحت نام های فوق معرفی شدند که بدون شک مواد گیاهی شان آلوده به ویروس بوده است و موتاسیون های ژنتیکی نیز در آنها اتفاق افتاده بود (شیراوند، 1390). در سال 1870، توماس ریورس[16] 14 نوع پایه کوتاه کننده از نوع پارادیس را در کتابش ذکر کرده است. کارهای تحقیقاتی در ایستگاه تحقیقاتی ایست مالینگ در انگلستان در سال 1912 با جمع آوری پایه هایی تحت عنوان پارادیس و دوسین از اطراف دنیا جهت تعیین هویت و شناسایی آنها شروع شد. ولینگتون[17] کار را آغاز کرد و توسط هاتون[18] دنبال شد. هاتون 71 پایه را از 35 منبع به دست آورد. او ضمن تایید ماهیت مخلــوطی از پایه های در دستـرس، گزارش می کند که 36% کلکسیون اولیه بیش از یک نوع فنوتیپ داشته اند و 66% آن غلط نامگذاری شده است. هاتون برای اینکه این پایه های مشخص شده دوباره با هم اشتباه نشوند، پیشنهاد کرد، هر پایه با اعداد رومی نامگذاری شود (نامگذاری اولیه در ایستگاه مالینگ به صورت اعداد رومی از I تا XXIV بود) انتخاب اعداد برای هر پایه بر مبنای اعداد درخت بود. در سال 1917 نخستین برنامه اصلاحی پایه سیب در ایستگاه تحقیقات سیب مالینگ انگلستان شروع شد. بسیاری از باغها در کشورهای مستعمره انگلستان بویژه در نیوزیلند و استرلیا به شته مومی سیب آلوده شده بودند، برای ایجاد پایه مقاوم به این آفت، انستیتوی جون اینيس[19] و ایستگاه تحقیقات ایست مالینگ برنامه مشترکی را در این زمینه شروع کردند. سریهای مرتون ایمیون[20] مثل MI.778 و793 . MIدر دهه 1930 معرفی شدند و به دنبال آن سریهای مالینگ مرتون (MM) مثل MM.115 و MM101 در سال 1952 به بازار عرضه شدند. مقاومت پایه های سریهای فوق الذکر به شته مومی سیب از والدشان یعنی نورترن اسپای[21] به آنها منتقل شده است. در ایالات متحده، از نظر تاریخی تولید اولیه محصول سیب از درختان بذری بود، که اینها از اروپا به آنجا وارد شده بود. بعداً ارقام مناسب بر روی پایه های بذری پیوند شدند، از گونه های مالوس بومی آمریکای شمالی کمتر استفاده می شد، چون میوه خیلی نامرغوبی تولید می کردند. پایه های پا کوتاه کننده ظاهراً در اوایل دهه 1800 از اروپا به ایالات متحده وارد شد. اما علاقه مندی متخصصین باغبانی به استفاده از پایه های کوتاه کننده کمتر بود، به استثناء مواردی که از آنها به عنوان گیاهان زینتی در حاشیه باغها و باغچه های خانگی استفاده می کردند. شپشک سن جوزه[22]، به عنوان یک آفت، صنعت میوه کاری امریکا را در دهه 1990 تهدید می کرد، و باغداران در ابتدا از پایه های کوتاه کننده به صورت تجارتی جهت سهولت در پوشاندن درخت برای ضدعفونی کردن با گاز سیانور استفاده کردند. بعد از اینکه محلول سولفور آهک به طور موثر مشکل آفت شپشک سن جوزه را حل کرد، مجدداً علاقه مندی به استفاده از پایه های کوتاه کننده کاهش یافت. در سال 1920 پایه EM.12 برای استفاده به عنوان پایه کلونی در مطالعه تغذیه ای در دانشکده ایالت پنسیلوانیا توسط آنتونی[23] وارد شد. چند سال بعد انواع متعددی از پایه های مالینگ بر آزمایش های باغی در نیویورک و پنسیلوانیا وارد شدند. در کانادا در سال 1927 ایستگاه آنتاریو[24] یک باغ پنج رقمی را بر روی چهار پایه مالینگ شروع کرد. در اروپای غربی استفاده از پایه های بذری جای خود را به پایه های کلونی M.2 و MM.106 بسته به نوع تراکم کشت داده است و در جنوب غربی اروپا پایه M.4 به طور گسترده استفاده می شود. سیستم های کشت خیلی متراکم به ویژه شکل پهن افقی به ویژه (Espalier) در فرانسه وداربست هایی به اشکال متنوع مثل شکل بوته دوکی (Spindle bush) در هلند بر روی پایه M.9 توسعه فراوان یافته است. اکنون بسیاری از کشت های مدرن در سایر قسمت های اروپا براساس سیستم کشت هلندی (Dutch) می باشد (شیراوند، 1390). 1-10- واریته های مختلف سیب 1-10-1- واریته های سیب ایرانی طبق آمار جمع آوری شده ارقام سیب محلی ایران متعدد و در حدود 136 نوع می باشد که از این ها 38 واریته زودرس و 72 واریته میان رس و 26 واریته دیررس می باشند. مهمترین واریته های سیب ایرانی عبارتند از: سیب گلاب اصفهان: میوه های این واریته دارای شکل کروی، رنگ آن سفید تا صورتی طعم آن شیرین و گلهای آن در اوایل فروردین ماه شکوفا می گردند میوه های این واریته زودرس و تا اواخر این ماه به بازار عرضه می گردند. سیب گلشاهی مشهد: میوه های این واریته کروی و رنگ آن سرخ تا سبز و درختان آن زود به گل نشسته و میوه های آن نیز در اواخر تیرماه می رسند. زرد مشهد: میوه های این گرد و پهن بوده و رنگ ان زرد و گوشت آن آبدار و دارای مزه شیرین است. میوه های این واریته بدون طعم به خصوص بوده و در نیمه دوم فروردین ماه گل می کنند. مدت زمان لازم از شکوفا شدن گلهای این واریته تا رسیدن کامل میوه آن در حدود 180 روز به طول می انجامد. سیب گلاب: دم میوه بلند، باریک و رنگ پوست آن سبز زیتونی و معطر می باشد. سیب گلاب به دلیل زودرسی و کیفیت خوب معروف است و در دشت های شهریار، قزوین، کرج و شاهرود گسترش دارد. شفیع آبادی: دارای رنگ مخلوط سرخ و سفید و شکل گرد و کمی کشیده و منظم می باشد. دارای پوستی صاف، شیرین و قدری کم آب است. در مناطق کرج و شهریار و اصفهان گسترش دارد. 1-10-2- واریته های سیب خارجی GOLDENBNRG: درختان این واریته دارای ارتفاع متوسط و خیلی زود بارور (2-4) سال می شود. مدت زمان بین گلدهی و رسیدن میوه در حدود 90 تا 95 روز می باشد. میوه آن متوسط بزرگ، رنگ زمینه آن سبز تا زرد و رنگ پوششی آن قرمز روشن، گوشت آن نسبتاً سفت ولی آبدار، مقدار اسیدیته آن زیاد و بدون عطر مخصوص است. GRAVENSTEINER: درختان این واریته پس از 4 تا 8 سال بارور شده و مقدار محصول سالیانه آن متناوب است. مدت زمان بین گلدهی تا رسیدن میوه تا حدود 110 تا 150 روز بوده و میوه های آن متوسط، زرد با نوارهای قرمز رنگ گوشت آن آبدار و دارای طعم بسیار مطبوعی می باشد. JAMES GRIEVE: میوه آن متوسط تا بزرگ و رنگ آن زرد با نوارهای قرمز کم رنگ و گوشت آن آبدار و دارای مزه ترش و خوش طــعم و بسیار مطبوع می باشد. درخــتان آن تقریباً کوتاه و خیلی زود بارور و بین (6-4) سال بارور می شوند. مدت زمان بین شکوفا شدن گل و رسیدن میوه در حدود 120-110 روز بوده و مقدار محصول سالیانه آن زیاد و بدون سال آوری می باشد. :COX ORANGE درختان این واریته دارای رشدی متوسط هستند و خیلی زود (5-4 سال) بارور می شوند. مدت زمان بین شکوفا شدن گل تا رسیدن میوه در حدود 150-130 روز می باشد. میوه های آن تقریباً متوسط ورنگ زمینه آن زرد و رنگ پوششی آن قرمز است. گوشت آن زرد رنگ و سفید و آبدار و بسیار معطر و تا اندازه ای ترش می باشد. MC INTOSH: درختان این واریته دارای رشد زیاد و پا بلند بوده و دوره رشد میوه آن در حدود 125 تا 130 روز به طول می انجامد. میوه آن کروی شکل، متوسط، رنگ گوشت آن سفید با رگه های قرمز رنگ و پوست آن قرمز روشن با لکه های سفید رنگ، گوشت آن سفید، آبدار و مزه آن شیرین و خوش طعم می باشد (شیرانوند، 1390). 1-11- آفات و بیماری های سیب مهمترین آفات سیب عبارتند از: حشرات مکنده: این دسته از شیره نباتی تغذیه نموده و مهمترین آنها که به سیب آسیب میرسانند عبارتند از شته ها، شپشک ها یا سپرداران و کنه ها. گروه سخت بال پوشان: گونه های زیادی ازین گروه به باغات سیب خسارت وارد می کنند که عبارتند از: سوسک کرم سفید ریشه، سوسک برگ خوار، سوسک های گرده خوار، سوسک های چوپ خوار و سوسک های پوست خوار. پروانه ها و مگس ها: این حشرات با وجود زیبایی، در مراحل تکامل از جمله آفات خطرناک درختان میوه از جمله سیب می باشد که شامل پروانه فری، پروانه کرم جگری، پروانه زنبور وش سیب، پروانه برگ خوار و پروانه میوه خوار است. مهمترین بیماری های سیب عبارتند از: بیماری های قارچی: مهمترین بیماری های قارچی که در درختان سیب موجب خسارت فراوانی می گردند عبارتند از: سفیدک سطحی سیب، پوسیدگی ریشه، روزالینا، بیماری پوسیدگی طوقه، بیماری لکه سیاه و شانکر سیب. بیماری های باکتریایی: از مهمترین بیماری های باکتریایی که در باغات ایران خسارت زیادی وارد می کند، بیماری آتشک و عامل این بیماری باکتری به نام Erwinia amylovora است که در بهار، شکوفه ها و سرشاخه ها را سیاه و خشک و برگه ها را به حالت سوخته در می آورد. بیماری های ویروسی: از عمده بیماری های ویروسی که به باغات ایران صدمه می زند، می توان موزاییک سیب، پهن یا کتابی شدن شاخه و بیماری روزت را نام برد (طه نژاد، 1380). 1-12- کشت بافت گیاهی به طور کلی به کشت سلول ها، بافت ها، اندام های استریل گياه، تحت شرایط مطلوب فیزیکی و شیمیایی آزمایشگاه "کشت بافت گیاهی" اطلاق می شود (کمال الدینی و همکاران، 1385). يا به عبارتی شامل رشد مواد گیاهی عاری از میکروب در یک محیط گندزدایی شده مانند محیط کشت غذایی ضد عفونی شده در یک لوله آزمایش می باشد. در سال های اخیر روش های کشت بافت گیاهی به یک ابزار بسیار قدرتمند برای تکثیر و به نژادی بسیاری از گونه های گیاهی توسعه یافته است. کشت بافت بر مبنای سه توانایی اصلی (قدرت باززایی، عدم تمایز و شایستگی گیاه) استوار شده است (تاجی و همکاران، 1384). 1-13- کاربرد کشت بافت گیاهی عمومی ترین دلایل کاربرد روش های درون شیشه ای برای تولید گیاه عبارتند از: 1- تکثیر کلنی یا ازدیاد سریع و در حجم وسیع گیاهان یکسان ژنتیکی حاصل از یک گیاه پایه برتر. 2- حذف عوامل بیماری. این امر انتقال مواد گیاهی از مرزهای بین المللی را تسهیل می نماید. 3- ایجاد گیاهان عاری از بیماری با کشت درون شیشه ای. 4- ذخیره ژرم پلاسم و نگهداری دراز مدت گیاهان پایه. 5- انتخاب جهش یافته ها از جهش های خود به خودی یا القائی. 6- تولید ریز قلمه های ریشه دار در گونه های زینتی چوبی سخت ريشه زا. 7- باز تولید هیبریدها از گونه های ناسازگار از طریق کشت جنین یا تخمک. 8- تولید گیاهان هاپلوئید، از طریق کشت بساک. ولی درقرن حاضر مهمترین کاربرد آن اصلاح گیاهان زراعی با استفاده از فناوری ژنی خواهد بود (سید طباطبایی، 1390). 1-14- بیان مسئله (منظور تحقیق) بنابر آنچه در مقدمه ذکر شد، ضرورت ايجاب مي نمايد تا پایه های پاکوتاه کننده سیب با استفاده از ازدياد رويشي تکثير و در برنامه‌هاي توسعه مورد استفاده قرار گيرند. از طرفی تکثير و توليد نهال سیب به روش های قلمه زدن و پيوند در شرايط کنوني با توجه به سخت ریشه زا بودن به کندي پيش مي رود. بنا بر اين کشت بافت و ریزازدیادی یکی از موثرترین تکنیک هايی است که برای تکثیر سریع غیرجنسی می تواند به کار گرفته شود.این روش از نظر زمان، فضا و وسایل مورد نیاز برتری اقتصادی دارد و می تواند نقش کاربردی مناسبی را در تولید و تامین نهال های سیب مورد نیاز کشور ایفا نماید. توليد و تکثير پايه های منتخب پاکوتاه کننده بومی، نياز کشور را به قلمه هاي وارداتي کاهش می دهد و از خروج ميزان قابل توجهی اي ارز از کشور جلوگيري می شود. 1-15- ضرورت انجام این تحقیق استفاده از کشت بافت و ريز ازديادي در تکثير رويشی ارقام پاکوتاه می تواند بسيار راه گشا باشد ولی هنوز پروتکل ريزازديادی سیب های پاکوتاه کننده مربایی و زینتی و تکثير تجاری آن ها در کشور در اختيار نيست. لذا ضروری به نظر می رسد تا با انجام تحقيقات گسترده برای دستيابی به پروتکل های مناسب برای ريزازديادی پایه های پاکوتاه کننده بومی تلاش شود. تحقیق حاضر به بررسی بهينه سازي روش ريزازديادي دوپايه بومي پاكوتاه كننده سيب (زينتی و مربايي) می پردازد. 1-16- اهداف عمده ی این تحقیق 1- بررسی اثر محیط های کشت مختلف و شرایط رشدی در کشت درون شیشه ای دوپايه بومي پاكوتاه كننده سيب در مراحل استقرار و شاخه زایی. 2- بررسی اثر هورمون های مختلف، بر القا، پرآوری شاخساره و ریشه زایی در دوپايه بومي پاكوتاه كننده سيب. 1-17- فرضیه های تحقیق 1- بکارگيری كشت بافت در تکثير پايه های پاکوتاه کننده سيب می تواند باعث كاهش ميزان واردات پايه هاي سيب در کشور شود. 2- با به کار گیری تکنیک های مختلف کشت بافت و بررسی جنبه های مختلف موضوع می توان به پروتکلی جهت تکثیر درون شیشه ای این نمونه ها دست یافت. 3- بااستفاده از ترکیبات مختلف تنظیم کننده های رشد در محیط های پایه می توان پرآوری شاخه و القا ریشه را در شرایط درون شیشه ای برای پایه های پا کوتاه کننده آزمایش، بهینه سازی کرد. 1-18- پرسش اصلی تحقیق چگونه با بهينه سازی نوع و ترکیب محیط کشت در محیط های مختلف کشت پایه می توان به استقرار درون شيشه ای موثر و القای شاخه زايي، پرآوری شاخساره و ریشه زایی در دو پایه پاکوتاه کننده سیب بومی مربایی و زینتی دست يافت؟ فصل دوم بررسی منابع 2-1- ریز ازدیادی ریزازدیادی عبارت است از تولید انبوه (در سطح تجاری) گیاه با استفاده از قسمت های بسیار ریز، بافت ها و اندام های گیاهی که در شرایط استریل درون لوله های آزمایش و یا ظرف های دیگری که محیط و مواد غذایی در آنها به دقت کنترل می شود، انجام می پذیرد. ریزازدیادی یا کشت اندام، معمولا با یک بخش سازماندهی شده گیاهی (اغلب یک جوانه) شروع می شود و روند کشت بافت این ساختار سازماندهی شده را حفظ میکند، در حالی که رشد و نمو بعدی، آن را به سمت تکثیر و باززایی یک گیاه کامل جدید سوق می دهد. این نوع کشت متفاوت از کشت هایی است که در آنها بافت های سازماندهی نشده ای مثل کالوس تولید می شوند(اثنی عشری، 1388). اخیرا کاربرد تکنیک های کشت بافت به منظور باززایی و تولید تجاری انواع گیاهان، بویژه آنهایی که به سختی تولید بذر می نمایند، به طور قابل توجهی پیشرفت نموده است و در حال حاظر، این روش ها در اغلب گونه های گیاهی جایگزین مهمی برای اکثر شیوه های عادی ازدیاد به شمار می آید. در سال 1991 تولید جهانی گیاهان ریزازدیادی، حدود 600 میلیون گیاه تخمین زده شد که بیشتر از گروه های گیاهان گلدانی، گلهای شاخه بریده و درختان میوه بودند (باقری، 1383). 2-2- ریزازدیادی درختان میوه فنون کشت بافت گیاهی به عنوان ابزاری قوی برای تکثیر رویشی محصولات باغبانی که دارای اهمیت اقتصادی فراوانی هستند و نیز محصولاتی که استعداد استفاده تجاری در آینده را دارند، به کار می روند (اثنی عشری، 1388). تولید پایههای پاکوتاه و رویشی عاری از ویروس لازمه احداث باغات متراکم با عملکرد بالا و مکانیزه میباشد به این جهت تکثیر پایههای رویشی از دیرباز به روشهای مختلف وجود داشته و هم اکنون نیز انجام میگیرد ولی روشهای معمول جوابگوی نیاز امروز باغبانی دنیا نیست. به جهت برخی محدودیتها از قبیل محدودیت در زمان تکثیر قلمه، محدودیت تأمین قلمه مورد نیاز از مواد گیاهی از طریق روشهای معمولی باعث گردیده در چند دهه اخیر در تکثیر گونههای گیاهی بخصوص درختان میوه از کشت درون شیشهای و ریزازدیادی بیشتر استفاده شود هاتچینسوم[25]و زيمرمن[26] (1987) در مورد کشت بافت سیب و ریزازدیادی آن مرور اطلاعات موجود در سالهای اوليه توسط زیمرمن (1984-1991) و اسکروین و همکاران (1986) و انجام شده است. در ذيل به بررسی چند عامل مهم در اين خصوص پرداخته می شود: 2-3- زمان تهیه ریز نمونه ها زمان استفاده از مواد گیاهی جهت ریزازدیادی بسیار مهم بوده، وقتی شاخه های در حال رشد جوانه گیری و کشت شوند میزان موفقیت افزایش می يابد، چون گیاه فعال بوده و بهتر با محیط کشت سازگاری خواهد داشت. زمان نمونه گیری در کاهش میزان آلودگی ریزنمونه ها نیز موثر است. در این زمینه کمالی و همکاران (1380) بهترین زمان برداشت نمونه های رویشی GF677 را اواسط بهار اعلام کردند. اما ایزدپناه (1380) در ازدیاد گیلاس وحشی (Prunus avaium) از طریق کشت درون شیشه ای، مناسب ترین فصل برداشت نمونه به علت مقاومت آنها در برابر مواد ضدعفونی کننده را زمستان گزارش کرده است. 2-4- ضدعفونی سطحی ریزنمونه ضدعفونی سطحی مواد گیاهی جوان معمولا مشکل نیست. البته اگر از درختان مسن استفاده شود، گاهی اوقات ریزنمونه های آلوده مشکل جدی محسوب می شوند مگر اینکه این درختان ساقه های جوان تولید کنند (واراگ[27] و همکاران، 1990). ریزنمونه هایی که از شاخه های در حال رشد گرفته شده اند گاهی اوقات نسبت به آن هایی که از قسمت های پیرتر شاخه گرفته شده اند ضدعفونی ساده تری دارند (اینجالریک[28] و همکاران، 1988). همچنین میزان آلودگی سطحی بسته به شرایط اقلیمی تعیین میگردد. تهیه ریزنمونه از گیاهانی که در آب و هوای مرطوب گرمسیری رشد می کنند بسیار مشکل تر از محیط های سردتر یا خشک تر است (اینجالریک و همکاران، 1988). میزان آلودگی غالبا به زمان جمع آوری مواد نیز بستگی دارد. بافت های جدا شده از جوانه های درختان 10 تا 40 ساله Pinus sylvestris (هوتولا[29] ،1988) و بافت های برگ از قلمه های ریشه دار Pinus pinaster (دوماس[30]، 1986) در صورتی که در زمستان جمع آوری شده باشند بیشترین آلودگی را دارند. به همین صورت مشکلات آلودگی در تعدادی از گونه های سخت چوب اروپایی (چالوپا، 1987) و همچنین Caria papaya که در زمستان جمع آوری شده بودند بسیار شدیدتر از آن هایی بود که در سایر فصول جمع آوری گردیده بودند (ذکر شده در: باقری، 1383). 2-5- مواد ضد عفونی کننده سطحی ضدعفونی سطحی ریزنمونه ها نیاز به مواد شیمیایی دارد که برای میکروارگانیسم ها سمی بوده، اما برای مواد گیاهی نسبتا غیر سمی باشد. کشت استریل بافت گیاهی با کشف مواد ضدعفونی کننده موثر که کاربردشان راحت بود، مانند هیپوکلریت کلسیم و هیپوکلریت سدیم ممکن شد. میزان تاثیر تیمار و نیز میزان آسیب وارده به بافت های زنده بستگی به مدت زمان و مقدار مصرف این مواد دارد. بنابر این، بایستی حد متعادلی از این دو را بکار برد. مهمترین مواد ضدعفونی کننده عبارتند از : الکل: برای ضدعفونی سطحی مواد گیاهی معمولا از الکل اتیلیک (اتانول) 70 درصد استفاده می شود، زیرا الکل 96 درصد باعث هیدراته شدن زیاد بافت گیاهی می شود. از الکل 96 درصد برای ضد عفونی ابزار و میز کار استفاده می شود. فرو بردن مواد گیاهی برای مدت چند ثانیه در الکل برای از بین بردن تمام میکروارگانیسم ها کافی نیست، چون الکل فقط موجودات سطحی را از بین می برد و بعد از آن بایستی از یک ماده ضدعفونی کننده دیگر مثل هیپوکلریت سدیم یا کلسیم استفاده شود. هیپوکلریت سدیم (NaOCl): این ماده به عنوان سفیدکننده در منازل (مثلا وایتکس) استفاده می شود. معمولا از هیپوکلریت سدیم یک درصد استفاده می شود. اگرچه گاهی از غلظت های بالاتر (تا 5 درصد) نیز می توان استفاده کرد. مدت زمان ضدعفونی معمولا بین 5 تا 30 دقیقه است و بدنبال آن مواد گیاهی چند مرتبه با آب استریل شستشو می شود. هیپوکلریت کلسیم: این ماده با فرمول شیمیایی Ca(OCl)2 و به صورت پودر است و می توان آن را به خوبی در آب معمولی حل نمود و محلول شفافی بدست آورد. با قرار دادن مواد گیاهی به مدت 5 تا 30 دقیقه در محلول هیپوکلریت کلسیم با غلظت بین 35 تا 100 گرم در لیتر ضدعفونی می شوند. کلرید جیوه (HgCl2): این ماده برای گیاه، انسان و دام خیلی سمی است و غلظت 1-1/0 درصد برای مدت 2 تا 10 دقیقه جهت ضدعفونی بکار می رود. شستشو باید با دقت انجام شود و محلول های باقی مانده از شستشو را نبایستی داخل ظرفشویی ریخت. پراکسید هیدروژن (H2O2): این ماده یک اکسیدان قوی است که می توان آن را به صورت محلول 3 تا 12 درصد به تنهایی و یا به همراه یک ماده ضدعفونی کننده دیگر برای ضدعفونی ریزنمونه ها بکار برد. مدت زمان تیمار بسته به ماده گیاهی از 5 تا 15 دقیقه متفاوت است و بعد از ضدعفونی بایستی بافت گیاهی را با آب استریل شستشو داد. سدیم دی کلرو ایزوسیانورات: این ماده در واقع نمک سدیم دی کلرو ایزوسیانورات می باشد که بدلیل سمیت کمتر برای ضدعفونی بافت های حساس به هیپوکلریت سدیم و کلسیم استفاده می شود. بعد از ضدعفونی با این ماده نیازی به شستشوی ریزنمونه نیست. آنتی بیوتیک ها، قارچ کش ها و باکتری کش ها: کاربرد تعدادی از آنتی بیوتیک ها ( نظیر آمپیسیلین، جنتامایسین، ریفامپیسین) همراه با سایر مواد ضدعفونی کننده، مثل الکل اتیلیک و هیپوکلریت، می تواند در کاهش آلودگی سطحی ریزنمونه ها بسیار موثر باشد. غوطه ور سازی ریزنمونه به مدت 30 دقیقه در محلول حاوی 50-100 میلی گرم در لیتر آنتی بیوتیک ها قبل از انجام کشت، برخی از میکروارگانیسم ها را از بین می برد. استفاده از تیمار قارچ کش هایی مثل بنومیل (5/0 درصد) برای ضدعفونی ماده گیاهی قبل از کشت نیز ممکن است به کاهش آلودگی قارچی کمک نماید (اثنی عشری، 1388؛ باقری، 1383). قویدل (1382) در بررسی که بر روی پایه M26 سیب انجام داد، تیماری که برای ضدعفونی ریزنمونه های تهیه شده در بهار و تابستان داشت، اتانل 70% به مدت 30 ثانیه و استفاده از کلرید جیوه ی 01/0% به مدت 5 و 10 دقیقه بود و این تیمار را بهترین تیمار برای ضدعفونی بیان نمود. وی گزارش کرد که ضدعفونی با هیپوکلرید سدیم تاثیری در از بین بردن آلودگی ندارد ولی با کلرید جیوه نتایج مطلوب گرفته است. البته اذعان داشت که افزایش زمان تماس ریزنمونه ها با کلرید جیوه، باعث کاهش آلودگی می شود ولی به علت پلی فنلی شدن بافت ها موجب نابود شدن کشت ها می شود. خواجه الدینی(1380) در مطالعه بر روی ریزازدیادی سیب، پایه ی MM.106، برای ضدعفونی ریزنمونه های تهیه شده، از هیپوکلرید سدیم 5% به مدت 10 دقیقه، اتانل 70% به مدت 30 ثانیه و کلرید جیوه 1/0% به مدت 10 دقیقه استفاده کرد. میری و همکاران (1382) با مطالعه بر روی سیب های M9 و M26 در شرایط درون شیشه ای با استفاده از شاخه های بهاره ی M26 و تابستانه M9 جهت ضد عفونی نمودن ریز نمونه ها ابتدا اتانول 70% را به مدت 30 ثانیه و سپس از غلظت های مختلف هیپوکلرید سدیم یا کلرید جیوه ی 1/0% به مدت 3 و 5 دقیقه به ترتیب برای ریز نمونه های M26 و M9 استفاده کردند. دانشجور حسینی (1387) در بررسی ریزازدیادی و غربال گری ژنوتیپ های پاکوتاه محلب (Prunus mahaleb L.) در شرایط درون شیشه ای گزارش کرد که ضدعفونی با اتانول 75% به مدت 1 دقیقه، کلرید جیوه 1/0% به مدت 2 دقیقه و 3 مرتبه شستشو با آب مقطر استریل، در کنترل آلودگی ها موثر بوده است. همچنین بیان کرد که نمونه های گرفته شده در ماه های تیر الی مهر درصد آلودگی پایینی داشته ولی جوانه ها فعال نمی شوند و یا در صورت فعال شدن در جابجایی از بین می روند. در صورتی که نمونه های گرفته شده از ژنوتیپ های منتخب در اواخر آبان و آذر به خوبی فعال شده و نیز درصد آلودگی کمی را از خود نشان می دادند. اوسترک[31] و همکاران (2004) نیز بر روی روش های ضدعفونی در گونه های جنس Prunus مطالعه کردند. ضد عفونی سطحی را با (Dicloro Isocyanuric Acid Na2 Salt) DICA انجام دادند که به میزان 6/16 میلی گرم در لیتر به مدت 15 دقیقه نتیجه مطلوبی نشان داد. به طوری که گیاهان قوی و نیرومند و دارای رشد مطلوب و فرم ریشه مناسب تشکیل شدند.

|
امتیاز مطلب : 0
|
تعداد امتیازدهندگان : 0
|
مجموع امتیاز : 0
مطالب مرتبط با این پست
می توانید دیدگاه خود را بنویسید


آخرین مطالب

/
به وبلاگ من خوش آمدید

💬 نظرات کاربران
💬ثبت نام کاربران
💬ورود کاربران